> Blog > Aħbarijiet tal-Industrija

X'inhuma l-funzjonijiet tal-kit ELISA?

2022-12-23

Kit ELISA huwa bbażat fuq fażi solida ta 'antiġen jew antikorp u tikkettjar ta' enzimi ta 'antiġen jew antikorp. L-antiġen jew l-antikorp marbut mal-wiċċ tat-trasportatur solidu għadu jżomm l-attività immunoloġika tiegħu, u l-antiġen jew l-antikorp immarkat bl-enzima jżomm kemm l-attività immunoloġika tiegħu kif ukoll l-attività tal-enżima. Fil-ħin tad-determinazzjoni, il-kampjun taħt test (li fih jitkejjel l-antikorp jew l-antiġen) jirreaġixxi mal-antiġen jew l-antikorp fuq il-wiċċ tat-trasportatur solidu. Il-kumpless antiġen-antikorp iffurmat fuq it-trasportatur solidu huwa separat minn sustanzi oħra fil-likwidu bil-ħasil.

Antiġeni jew antikorpi mmarkati b'enżimi huma miżjuda, li wkoll jorbtu mat-trasportatur solidu b'reazzjoni. F'dan iż-żmien, l-ammont ta 'enzima fil-fażi solida huwa fi proporzjon mal-ammont ta' sustanza fil-kampjun. Wara li żżid is-sottostrat tar-reazzjoni tal-enżima, is-sottostrat jiġi katalizzat mill-enzima biex isiru prodotti ikkuluriti. L-ammont tal-prodott huwa direttament relatat mal-ammont tas-sustanza ttestjata fil-kampjun, għalhekk tista 'titwettaq analiżi kwalitattiva jew kwantitattiva skont il-fond tal-kulur.

L-effiċjenza katalitika għolja tal-enzimi tkabbar indirettament ir-riżultati tar-rispons immuni, u tagħmel l-assaġġ sensittiv ħafna. ELISA jista 'jintuża biex jiddetermina l-antiġeni, iżda jista' jintuża wkoll biex jiddetermina l-antikorpi.

Prinċipji bażiċi tal-kit ELISA
Juża reazzjoni speċifika ta 'antiġen u antikorp biex jgħaqqad l-oġġett ma' l-enzima, u mbagħad jipproduċi reazzjoni tal-kulur bejn l-enzima u s-sottostrat għal determinazzjoni kwantitattiva. L-oġġett tal-kejl jista 'jkun antikorp jew antiġen.

Hemm tliet reaġenti meħtieġa f'dan il-metodu ta' determinazzjoni:
â Antiġen jew antikorp tal-fażi solida (assorbent immuni)
â¡ Antiġen jew antikorp immarkat b'enzima (markatur)
â¢ sottostrat għall-azzjoni tal-enżimi (aġent tal-iżvilupp tal-kulur)

Fil-kejl, l-antiġen (antikorp) huwa l-ewwel marbut mat-trasportatur solidu, iżda xorta jżomm l-attività immuni tiegħu, u mbagħad jiġi miżjud konjugat (markatur) ta 'antikorp (antiġen) u enzima, li xorta jżomm l-attività immuni u l-enzima oriġinali tiegħu. attività. Meta l-konjugat jirreaġixxi mal-antiġen (antikorp) fuq it-trasportatur solidu, jiżdied is-sottostrat korrispondenti tal-enzima. Jiġifieri, idroliżi katalitika jew reazzjoni REDOX u kulur.

L-isfumatura tal-kulur li tipproduċi hija proporzjonali għall-ammont ta 'antiġen (antikorp) li għandu jitkejjel. Dan il-prodott ikkulurit jista 'jiġi osservat mill-għajn, mikroskopju ottiku, mikroskopju elettroniku, jista' wkoll jitkejjel permezz ta 'spettrofotometru (strument tat-tikketta tal-enzima). Il-metodu huwa sempliċi, konvenjenti, veloċi u speċifiku.

Preċedenti:Introduzzjoni ta 'Elisa Plate

Li jmiss:Għaliex il-kultura taċ-ċelluli lyse ċelluli ħomor tad-demm l-ewwel?