> Aħbarijiet > Aħbarijiet tal-Industrija

Għaliex il-kultura taċ-ċelluli lyse ċelluli ħomor tad-demm l-ewwel?

2022-12-23

Introduzzjoni bażika
Lisat tal-eritroċiti huwa wieħed mill-aktar metodi sempliċi u faċli biex jitneħħew iċ-ċelluli ħomor tad-demm, jiġifieri, biex jinqasam iċ-ċelluli ħomor tad-demm b'lysate, li ma jagħmilx ħsara liċ-ċelluli nukleati u jista 'jneħħi kompletament iċ-ċelluli ħomor tad-demm. Il-qsim tal-lysate huwa metodu ħafif tat-tneħħija taċ-ċelluli ħomor tad-demm, li jintuża prinċipalment għas-separazzjoni u l-purifikazzjoni taċ-ċelluli tat-tessuti mxerrda permezz tad-diġestjoni tal-enżimi, is-separazzjoni u l-purifikazzjoni tal-limfoċiti, u t-tneħħija taċ-ċelluli ħomor tad-demm fl-esperimenti tal-proteini tat-tessuti u nuklejċi. estrazzjoni ta 'aċidu. Iċ-ċelluli tat-tessut miksuba mill-lisat taċ-ċelluli ħomor tad-demm ma fihomx ċelluli ħomor tad-demm, u jistgħu jintużaw aktar għal kultura primarja, fużjoni taċ-ċelluli, ċitometrija tal-fluss, separazzjoni u estrazzjoni ta 'aċidu nuklejku u proteina, eċċ.

Istruzzjonijiet għall-użu
Kampjun taċ-ċelluli tat-tessut
1. Tessuti friski ġew diġeriti mill-frixa/enżima jew collagenase u mxerrda f'sospensjoni ta 'ċellula waħda, u s-supernatant ġie mormi permezz ta' ċentrifugazzjoni.

2. Ħu ELS lysate mill-friġġ f'4â, żid ELS lysate mal-preċipitat taċ-ċellula fi proporzjon ta '1:3-5 (żid 3-5ml ta' lysate ma '1ml ta' ċellula kompatta), daqqa bil-mod u ħawwad.

3. Iċċentrifuga fi 800-1000rpm għal 5-8 minuti u armi l-likwidu ċar aħmar ta 'fuq.

4. Il-parti preċipitata ġiet miġbura u ċentrifugata b'soluzzjoni ta 'Hank jew soluzzjoni ta' kultura mingħajr serum għal 2-3 darbiet.

5, jekk il-qsim ma jkunx komplut/komplet jista 'jiġi ripetut passi 2 u 3.

6. Ċelloli ta 'sospensjoni mill-ġdid għal esperimenti sussegwenti; Jekk l-RNA jiġi estratt, huwa aħjar li tagħmel dan fis-soluzzjoni ppreparata mill-Pass 4 bl-użu ta 'ilma DEPC

Iċ-ċelluli ħomor tad-demm għandhom ċiklu tal-ħajja qasir ħafna, 120 jum biss, iżda jirriproduċu d-demm malajr ħafna, u f'dan il-każ huma partikolarment kapaċi ta 'diviżjoni taċ-ċelluli, u huma l-aktar ċelluli ta' diviżjoni mgħaġġla minn kulħadd, għalhekk din iċ-ċellula hija siewja ħafna, għalhekk huwa utli ħafna għall-kultura taċ-ċelluli. Hija sempliċi ħafna, m'għandha l-ebda organelli fiha, biss membrani taċ-ċelluli u proteini.

Preċedenti:X'inhuma l-funzjonijiet tal-kit ELISA?

Li jmiss:Rekwiżiti tar-reaġenti u rappreżentazzjoni bażika tal-konċentrazzjoni tas-soluzzjoni.